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      人白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒技術說明書
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        人白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒技術說明書

        BS-9770人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒

        一、產品概述

        本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定法(ELISA),專用于定量檢測人血清、血漿及相關生物液體樣本中白細胞介素17(IL-17)的含量。IL-17是一種由Th17細胞分泌的促炎細胞因子,在自身免疫疾病和炎癥反應中起關鍵作用。

        二、檢測原理

        雙抗體夾心技術:

        預包被抗人IL-17單抗的微孔板捕獲樣本中的IL-17。

        加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的二抗,形成“抗體-抗原-酶標抗體"復合物。

        通過TMB顯色反應,顏色深淺與IL-17濃度呈正相關,450nm波長下測定吸光度(OD值)。

        三、試劑盒組成

        組分規格(96孔配置)保存條件

        酶標包被板1×96孔2–8℃

        標準品(270ng/L)0.5ml×1瓶2–8℃(長期-20℃)

        標準品稀釋液1.5ml×1瓶2–8℃

        酶標試劑6ml×1瓶2–8℃

        樣品稀釋液6ml×1瓶2–8℃

        顯色劑A/B液各6ml×1瓶2–8℃避光

        終止液6ml×1瓶2–8℃

        濃縮洗滌液20ml×30倍×1瓶2–8℃

        說明書1份室溫

        四、樣本處理要求

        血清/血漿:

        室溫靜置10–20分鐘,2000–3000轉/分離心20分鐘,取上清液

        避免反復凍融,若出現沉淀需再次離心

        細胞培養上清:

        離心后取上清,檢測分泌性成分時需無菌操作

        尿液/組織勻漿:

        尿液離心后取上清;組織樣本需勻漿后離心分裝

        五、操作步驟

        標準品稀釋:

        梯度稀釋標準品(如270ng/L至1ng/L),每孔加樣50μL

        樣本加樣:

        樣本稀釋后加10μL至微孔,加樣量40μL(總稀釋度5倍)

        溫育:

        37℃避光反應30分鐘,封板膜覆蓋

        洗滌:

        洗滌液浸泡1分鐘/次,重復3–5次,拍干孔內液體。

        顯色與終止:

        加入TMB顯色液避光反應15–20分鐘,終止液終止反應。

        讀數:

        酶標儀450nm波長測定OD值,通過標準曲線計算濃度。

        六、性能指標

        靈敏度:低至0.1pg/mL(小鼠IL-17參考值) ,人IL-17約3.8pg/mL。

        檢測范圍:7.8–500pg/mL(人IL-17C參考值) ,或31.3–2000pg/mL(人IL-17)。

        特異性:與IL-17家族其他成員(如IL-17B、IL-17F)無交叉反應。

        重復性:板內/板間變異系數<10%

        七、注意事項

        保存條件:

        試劑盒2–8℃保存,標準品長期存放需-20℃

        有效期:

        6個月(4℃),12個月(-20℃)。

        實驗環境:

        避免強光照射,顯色液需37℃預平衡。

        八、參考文獻

        雙抗體夾心法原理及操作規范

        樣本處理與保存指南

        試劑盒性能驗證數據

        注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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